+ Método de Orceína de Unna-Tanzer
- Para este método se utilizan los reactivos:
a) Solución de Orceína (Tanzer): Orceína (1 gr) + Alcohol 70% (100 mL) + Acido clorhídrico concentrado (1 gr).
b) Hematoxilina
- El procedimiento de este método fue el siguiente:
Una vez desparafinada e hidratada hasta alcohol 70% se realizo una tinción durante 30 minutos a 2 horas en solución de Orceína a temperatura ambiente. Después se lavaron en alcohol 70%, se observaron al microscopio, se diferenciaron en alcohol 70% y se fueron realizando controles al microscopio. Se lavaron en abundante agua destilada durante 5 minutos, se realizo una tinción con Hematoxilina durante 5-10 minutos, se lavaron en agua corriente durante 5-10 minutos, deshidrataron en alcoholes crecientes, aclararon en Xilol y montaron en resina sintética.
- Los resultados esperados para este método son fibras elásticas café rojizo y núcleos azules.
+ Método de Verhoeff
- Para este método se utilizan los reactivos:
a) Hematoxilina de Verhoeff: Hematoxilina alcohólica 10% (25 mL) + Alcohol etílico absoluto (25 mL) + Cloruro férrico 10% (25 mL) + Solución Yodo Verhoeff [Yodo (2 grs) + Yoduro de K (4 grs) + Agua destilada (100 mL)] (25 mL).
b) Solución de Cloruro férrico 2%; c) Solución de Van Gieson; d) Tiosulfato de Na (Hiposulfito) 5%
- El procedimiento de este método fue el siguiente:
Una vez desparafinada e hidratada la muestra se realizo una tinción con Hematoxilina de Verhoeff durante 15 minutos, se lavaron con agua destilada y se diferenciaron con Cloruro férrico al 2% durante unos minutos controlando la coloración al microscopio. Luego se lavo en agua corriente y en agua destilada, se coloco en Tiosulfato de Na 5% por 1 minuto, contrasto en solución de Van Gieson por 10 segundos, se diferencio en alcohol 95%, deshidrato, aclaro en Xilol y monto en resina sintética.
- Los resultados esperados para este método son fibras elásticas azul oscuro o negro; núcleos azul a negro; fibras colágenas rojo; y otros elementos tisulares amarillos.
*Manual de Laboratorio de Técnica Histológica (Guía de trabajos y datos útiles para el alumno), Profesor Marco Antonio Loyola Brambilla, Mención de Morfofisiopatología y Citodiagnóstico, Carrera Tecnología Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Concepción.
- Para este método se utilizan los reactivos:
a) Solución de Orceína (Tanzer): Orceína (1 gr) + Alcohol 70% (100 mL) + Acido clorhídrico concentrado (1 gr).
b) Hematoxilina
- El procedimiento de este método fue el siguiente:
Una vez desparafinada e hidratada hasta alcohol 70% se realizo una tinción durante 30 minutos a 2 horas en solución de Orceína a temperatura ambiente. Después se lavaron en alcohol 70%, se observaron al microscopio, se diferenciaron en alcohol 70% y se fueron realizando controles al microscopio. Se lavaron en abundante agua destilada durante 5 minutos, se realizo una tinción con Hematoxilina durante 5-10 minutos, se lavaron en agua corriente durante 5-10 minutos, deshidrataron en alcoholes crecientes, aclararon en Xilol y montaron en resina sintética.
- Los resultados esperados para este método son fibras elásticas café rojizo y núcleos azules.
+ Método de Verhoeff
- Para este método se utilizan los reactivos:
a) Hematoxilina de Verhoeff: Hematoxilina alcohólica 10% (25 mL) + Alcohol etílico absoluto (25 mL) + Cloruro férrico 10% (25 mL) + Solución Yodo Verhoeff [Yodo (2 grs) + Yoduro de K (4 grs) + Agua destilada (100 mL)] (25 mL).
b) Solución de Cloruro férrico 2%; c) Solución de Van Gieson; d) Tiosulfato de Na (Hiposulfito) 5%
- El procedimiento de este método fue el siguiente:
Una vez desparafinada e hidratada la muestra se realizo una tinción con Hematoxilina de Verhoeff durante 15 minutos, se lavaron con agua destilada y se diferenciaron con Cloruro férrico al 2% durante unos minutos controlando la coloración al microscopio. Luego se lavo en agua corriente y en agua destilada, se coloco en Tiosulfato de Na 5% por 1 minuto, contrasto en solución de Van Gieson por 10 segundos, se diferencio en alcohol 95%, deshidrato, aclaro en Xilol y monto en resina sintética.
- Los resultados esperados para este método son fibras elásticas azul oscuro o negro; núcleos azul a negro; fibras colágenas rojo; y otros elementos tisulares amarillos.
*Manual de Laboratorio de Técnica Histológica (Guía de trabajos y datos útiles para el alumno), Profesor Marco Antonio Loyola Brambilla, Mención de Morfofisiopatología y Citodiagnóstico, Carrera Tecnología Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Concepción.
