- Proteínas generalidades
- Propiedades proteínas
- Introducción a la purificación
- Preparación de extractos
- Fraccionamiento subcelular
- Técnicas de precipitación
- Introducción a cromatografías
- Cromatografías de intercambio iónico
- Cromatografías de interacciones hidrofóbicas
- Cromatografías de exclusión molecular
- Cromatografías de afinidad
- Electroforesis
- Electroelución y electrotransferencia
- Medición actividad enzimática
- Medición antígenos y anticuerpos
- ELISA
- Medición unión receptor-ligando
- Determinación de secuencias de proteínas
- Base de datos
- Búsqueda de motivos y sitios funcionales
- Predicción de estructuras de proteínas
- Modelaje molecular
- Determinación de estructuras de proteínas
II. BIOLOGIA MOLECULAR
- Estructura y función de ADN
Estructura de nucleótidos, Estructura doble hebra (hélice) del ADN, Reglas de Chargaff, Proporciones de bases en diferentes organismos, Contenido de G y C, Determinación de la pureza y concentración de ADN en solución por espectrometría de absorción, Visualización de ADN por microscopía electrónica, Desnaturación térmica del ADN, Concepto de Tm, Propiedades fisico-químicas del ADN, Hibridación del ADN, Factores que afectan el proceso de hibridación, Concepto de estrictez de hibridación, Plásmidos, Estructura del ARN.
- Técnica de PCR
Principio de la técnica de PCR, Etapas y ciclos de la PCR, Componentes de la reacción de PCR, Características de los oligonucleótidos partidores, Análisis de los productos de PCR por electroforesis en geles de agarosa, Aplicaciones de la PCR en diferentes áreas de la biología.
- Obtención de ADN genómico
Diferentes fuentes para obtención de ADN, Técnicas de obtención de ADN genómico (orgánica, helex y papel FTA), Obtención ADN genómico diferencial, Cuantificación ADN genómico por comparación de intensidad de bandas con estandares.
- Técnica de electroforesis en gel
Componentes del sistema de electroforesis, Medios de soporte, Factores que influyen en velocidad de migración del ADN, Relación velocidad de migración y factores que afectan migración, Separación de ADN por electroforesis en geles de agarosa, Determinación tamaño de fragmentos de ADN por relación migración y tamaño, Separación de proteínas en geles de acrilamida.
- Análisis de enfermedades genéticas por PCR
Genoma humano y cromosomas, Análisis de la Fibrosis Quistica por PCR y ARMS, Análisis de la distrofia muscular y hemofilia por PCR, Determinación de enfermedades genéticas ligadas al cromosoma X.
- Tipificación genética en humanos
Etapas de procesamiento del ADN muestra, Marcadores genéticos, Tipos de polimorfismo, Concepto de locus, alelos y repeticiones, Nomenclatura para definir un locus y repeticiones, Tipos de repeticiones en tandem VNTR y STR, Análisis de paternidad por VNTR, Frecuencia de alelos VNTR, Marcadores STR, PCR múltiple para locus STR, Relación entre el número de locus STR analizados y discrimación genética entre individuos, PCR en tiempo real, Cuantificación de ADN por PCR en tiempo real, Determinación experimental y utilización del valor CT, Rangos adecuados de cantidad de ADN para análisis locus STR, Ejemplos de Kits comerciales para PCR múltiple de STR (11 y 16 locus), Lectura e interpretación electroferogramas, Análsis y cálculo estadístico de grado de discriminación.
