BIOQUIMICA
1. Explique la utilidad de los siguientes procesos en la purificación de proteínas en base a su fundamento.
A) Homogeneización
B) Cromatografías de interacciones hidrofóbicas
C) Espectrometría de masas
D) Diálisis
E) Fraccionamiento con calor
F) Cromatografía de filtración molecular
G) Búsqueda de motivos
H) Precipitación con sulfato de amonio
I) Cromatografía con columnas de Sephadex G-100
J) Alineamiento de secuencias
K) Cromatografía con columnas de DEAE-Celulosa
M) SDS-PAGE
N) Isoelectroenfoque
2. Esquematice un protocolo para la purificación de una proteína con actividad enzimática, explicando la función de cada etapa en general (captura, purificación inicial y purificación final) seleccionando un método especifico para cada una y explicando sus fundamentos. Incluya en su respuesta los puntos de la pirámide de eficiencia (resolución, capacidad, velocidad de proceso y recuperación) en las etapas generales y considere además la necesidad de explicar como medirá la actividad enzimática en cada paso.
3. Complete la siguiente tabla de purificación
*Tabla de purificación (ejemplo)
¿Qué paso eliminarías y porqué?, basándote en los fundamentos del método y en los datos obtenidos en la tabla.
4. Explique en que consiste la cristalografía por rayos x, sus aspectos básicos, componentes, principios físicos y mecanismo de este método.
5. Haga un listado de los principales pasos de la determinación de la estructura de una proteína por cristalografía por rayos x y explique los problemas generales y sus etapas limitantes o fases críticas.
6. ¿Cuales son las etapas y tipos de un test de ELISA y en que se diferencia de un Western-blot?
7. Señale los principios de una electroforesis de proteínas y como puede ser utilizada para determinar pesos moleculares de proteínas.
1. Explique la utilidad de los siguientes procesos en la purificación de proteínas en base a su fundamento.
A) Homogeneización
B) Cromatografías de interacciones hidrofóbicas
C) Espectrometría de masas
D) Diálisis
E) Fraccionamiento con calor
F) Cromatografía de filtración molecular
G) Búsqueda de motivos
H) Precipitación con sulfato de amonio
I) Cromatografía con columnas de Sephadex G-100
J) Alineamiento de secuencias
K) Cromatografía con columnas de DEAE-Celulosa
M) SDS-PAGE
N) Isoelectroenfoque
2. Esquematice un protocolo para la purificación de una proteína con actividad enzimática, explicando la función de cada etapa en general (captura, purificación inicial y purificación final) seleccionando un método especifico para cada una y explicando sus fundamentos. Incluya en su respuesta los puntos de la pirámide de eficiencia (resolución, capacidad, velocidad de proceso y recuperación) en las etapas generales y considere además la necesidad de explicar como medirá la actividad enzimática en cada paso.
3. Complete la siguiente tabla de purificación
*Tabla de purificación (ejemplo)
¿Qué paso eliminarías y porqué?, basándote en los fundamentos del método y en los datos obtenidos en la tabla.4. Explique en que consiste la cristalografía por rayos x, sus aspectos básicos, componentes, principios físicos y mecanismo de este método.
5. Haga un listado de los principales pasos de la determinación de la estructura de una proteína por cristalografía por rayos x y explique los problemas generales y sus etapas limitantes o fases críticas.
6. ¿Cuales son las etapas y tipos de un test de ELISA y en que se diferencia de un Western-blot?
7. Señale los principios de una electroforesis de proteínas y como puede ser utilizada para determinar pesos moleculares de proteínas.
